Immunologie

c koi le programme Regressi?

euh peti truc comme ca on a pas commencé l'immuno...

dans le goupe A on a fait le TP d'immunoprécipitation avec les techniques d'ouchterlony et mancini

bababa je veu pa le savoir
on en pa fait en cours

non au fait si mes souvenirs sont bon, le professeur nous a dit: "vous ferez votre courbe sur Regressi, si vous l'avez utilisés". Ce a quoi la classe a répondu en choeur: "Régressi?"

Finalement, le prof nous a dit de le faire sur Excel.

Regressi serait donc un tableur, mais si on ne l'a pas on fait sur excel sans problème.

ok merci bcp donc il faut juste tracer la courbe sur excel

oui c'est ca, Elise.

Important: j'ai encore perdu ma feuille d'énoncé en immuno... (ca commence à être pénible! )

Est ce que quelqu'un du grpe A pourrait rapidement me transmettre les questions de l'énoncé sur Mancini-Ouchterlony. Ainsi que le nom du sérum utilisé (alb bovine?) MERCI BEAUCOUP!!

OUCHTERLONY:
1/ Indiquer sur les gabarits présentés en annexe l'emplacement des dépots
2/ Scématiser précisément les arcs obtenus
3/ Conclure sur la pureté de chaque fraction de la protéine P

MANCINI:
1/ Indiquer le mode opératoire de réalisation de la gamme d'étalonnage sous la forme d'un tableau
2/ Indiquer sur le gabarit présenté en annexe l'emplacement des dépots
3/ Après la lecture compléter le tableau présenté en annexe
4/ Construire sur papier milimétré la droite d'étalonnage : carré du diamètre = f(concentration), déterminer la concentration dans les échantillons
5/ meme opération en utilisant l'outil informatique : le programme régressi ou un analogue

merci! je vais essayer de faire du mieux que je peux, avec ce qu'il me reste! @ lundi

Si je dis pas de betise, Regressi est un logiciel de mesures, enfin un programme qui permet d'exploiter des données experimentales ... (vive la 2nde MPI)

c'est sur vive la 2nd MPI surtout pour cramé les résistence (enfin c'est qu'on faisait dans ma classe, peut etre qu'a nantes vous êtes un peu plus serieux que nous

Hélène a écrit:c'est sur vive la 2nd MPI surtout pour cramé les résistence (enfin c'est qu'on faisait dans ma classe, peut etre qu'a nantes vous êtes un peu plus serieux que nous

... pas beaucoup plus, je ne pense pas... LOL

En revanche, je crois pas avoir vu Regressi en 2nde MPI...

bonjour tous ou plutôt bonsoir,
y'a pas quelqu'un qui peut m'aider sur les calculs de BCM avec les concentrations???
car là j'suis perdue car on met la protéine P dans les cupules avec laquelle on à fait une gamme donc avec des dilutions au demi à chaque fois, puis on remet de la protéine P cette fois soit dilué au 1/5000 ou au 1/10000. et y'a les autres volumes aussi mais on effectue des lavages aussi....
enfin voilà quoi si quelqu'un pouvait m'éclairer un peu sur tout ceci histoire que je puisse finir mon compte rendu quand même;
merci d'avance

tout d abord dans tes cupules tu as l Ac I puis ensuite tu mets de l Ag ensuite tumest l Ac II soit il aété dilué au 1/5000 ou bien 1/10000
Pour tes essais on a mis une solution de protéine P echantillon dilué au 1/10
moi pour mes absorbances essai j ai les est reporté sur la courbes puis j ai multiplié les valeur que j ai trouvé par le facteur de 10

merci damdam
mais je parlais surtout justement des concentrations qu'ils faut pour construire la courbe!!
est ce qu'on prend que le tableau de gamme de la protéine P pour tracer les courbes??
moi j'obtient 100 50 25 12.5 6.25 3.125 1.5625 0.7813 0.3906 0.1953 0.098 est ce que c ça?

oui c'est ça par contre moi j'ai arrondi centième

un grd merci

pour le tracé de l'Abs= f(log concentration en P), il faut tracé une droite qui passe par le maximum de point, ou une courbe?

Etant donné, que tes points corespondent a un etalonnage, je dirai qu'il faut faire une droite (comme en bioch quoi )

Mais je n'en suis pas sur

moi j'ai tracé une droite car comme dit françois c'est une gamme d'étalonnage mais je sais que dans mon groupe il y en a qui on tracé une courbe donc pareil j'suis pas complètement sur mais je supposerais que c'est ainsi qu'il faut procéder voilà très chère amie je t'ai gratifié de mon aide....
bizz

est ce quelqu'un peut me dire a quoi sert lesz témoins en H2 et G2 car je comprend pas tro!!sont ils égale a 0 car âs moi c'est normal

Ils ne sont pas égal a zero parce que la manip contient une "erreur" entre guillemet dont on parlera au cours prochain. Pour lire tes absorbances correctement, il te faut a chaque fois soustraire l'absorbance du temoin.

Ensuite tu pourra tracer ta courbe.

En esperant t'avoir aidé

c est normal qu ils soit égal a zéro dan les temoins on met tout sauf l antigène. On a fait ces temoin pour si l Ac I allait former un imun complexe avec l Ac II. ton absorbance lue est de zero donc dans ton temoin il n ya pas de formation d immun complexe et quand l Ac I et Ac II n ont pas réagi ensemble.

A parce que toi Damien tu avais une absorbance de 0 a tes témoins?

C'est surement le cas si tu le dis, mais pour beaucoup il etait positifs. Parce que les Ac II tout comme les Ac I ont pu (en moindre proportion) se fixer au fond des cupules. Du coup, il y a un peu d'enzyme dans la cupule, d'ou la réaction coloré, certes moins importantes que les cupules tests, mais tout de meme présente.

Connaissant votre TP ELISA pour l'avoir déjà utiliser, normalement, vous ne devriez pas avoir une absorbance égale à 0 pour vos témoins car il faut soustraire cette absorbance à vos essais!